Colunas HPLC: como escolher a coluna certa para o seu método
A cromatografia líquida de alta eficiência separa compostos com base nas suas propriedades físico-químicas e na interação com a fase estacionária.
A escolha da coluna influencia diretamente a resolução, a sensibilidade e a reprodutibilidade do método.
O primeiro critério de seleção é a fase estacionária:
- A fase C18 é a mais utilizada em fase reversa, adequada a uma grande variedade de compostos de polaridade média a baixa. A C8 oferece menor retenção e é indicada para compostos mais polares.
- As fases Phenyl e CN têm selectividade distinta para compostos aromáticos e de polaridade intermédia, respectivamente.
- As fases NH2 e APS são indicadas para hidratos de carbono e análises em fase normal.
- A fase Si é utilizada em fase normal para compostos apolares.
O segundo critério é a partícula e o sistema:
- Para sistemas UHPLC, são necessárias colunas com partículas de 1,7 a 2,5 µm;
- Para HPLC convencional, partículas de 3 a 5 µm são as mais comuns.
O comprimento e o diâmetro interno da coluna determinam a eficiência e o caudal adequados.
A Maldral disponibiliza colunas de múltiplas marcas, incluindo alternativas equivalentes às referências mais utilizadas nos laboratórios, com qualidade comprovada e preço competitivo.
Se o seu método foi desenvolvido com uma marca específica e procura uma alternativa compatível, a nossa equipa analisa as especificações e apresenta uma proposta adequada.
Para encomendas ou pedidos de equivalência, contacte-nos por telefone ou email nos dias úteis, das 9h às 13h e das 14h às 18h.
Perguntas Frequentes
Que fases estacionárias estão disponíveis para HPLC na Maldral?
Dispomos de colunas com fases C18, C8, C4, CN, NH2, Phenyl, Si, Diol, ODS e APS, de múltiplas marcas e em diferentes comprimentos e diâmetros.
Qual a diferença entre as fases C18 e C8 em HPLC?
A C18 tem maior retenção e é adequada para compostos de polaridade média a baixa; a C8 oferece menor retenção e é indicada para compostos mais polares ou quando se pretende reduzir o tempo de análise.
Que colunas são compatíveis com sistemas UHPLC?
Para UHPLC são necessárias colunas com partículas de 1,7 a 2,5 µm, capazes de suportar pressões elevadas. A Maldral dispõe de referências adequadas a estes sistemas, como a gama VDSpher.
Como escolher entre fase normal e fase reversa?
A fase reversa, com fases como C18 ou C8, é a mais utilizada para compostos de polaridade média a baixa em solventes aquosos; a fase normal, com fases como Si ou NH2, é indicada para compostos apolares em solventes orgânicos.
A Maldral disponibiliza equivalências a colunas de outras marcas?
Sim. A equipa Maldral analisa as especificações da coluna em uso e identifica alternativas equivalentes de marcas disponíveis no catálogo, com qualidade comprovada e preço mais competitivo.
Que marcas de colunas HPLC estão disponíveis?
O catálogo inclui colunas das marcas VDSpher, Tracer, Spherisorb, Nucleosil, LiChrospher, LiChrosorb, Kromasil, Hypersil, Eurospher, Inertial, Europa Protein, Mediterranea Sea e Hyperpack, entre outras.
Que fatores devo considerar ao escolher o comprimento e o diâmetro da coluna?
As colunas mais longas oferecem maior resolução mas aumentam o tempo de análise; diâmetros menores são mais eficientes mas exigem caudais mais baixos. A escolha deve ser ajustada ao sistema disponível e ao método analítico.
Como posso saber se uma coluna é adequada para análise de proteínas ou péptidos?
As colunas com fases de poro largo, como a Europa Protein ou Mediterranea Sea C18, são optimizadas para biomoléculas. A equipa Maldral ajuda a identificar a opção mais adequada para a sua aplicação.
O que fazer se não encontrar a coluna pretendida no catálogo?
Contacte-nos por telefone ou email nos dias úteis, das 9h às 13h e das 14h às 18h. A equipa verifica a disponibilidade e apresenta alternativas compatíveis com o seu método.
